Milline on parim viis kloroplastide eraldamiseks puhvrist?

2024 Autor: Fiona Howard | [email protected]. Viimati modifitseeritud: 2024-01-10 06:36

Pigmentide väljatõmbamiseks suspendeeritakse kloroplastid isolatsioonipuhvris. Et saaksime kloroplastidest pigmente eraldada, peame esm alt puhvrist lahti saama. Milline on parim viis kloroplastide eraldamiseks puhvrist? kasutage tsentrifuugi, et eraldada

Kuidas kloroplasti isoleerida?

Kloroplasti eraldamise meetodi puhul purustatakse rakusein mehaaniliselt segisti või homogenisaatoriga. Seejärel eemaldatakse filtreerimise teel katkematu lehekude ja rakujäänused. Kloroplastid kogutakse tsentrifuugimise teel, kasutades perkolli gradienti.

Kuidas teha kloroplasti isolatsioonipuhvrit?

Valmistage ette vajalik kogus 1X kloroplasti eraldamise puhvrit, lahjendades 2X puhvri varu 1:1 dH2O veega Lisage 10 µL 10% BSA lahust 1 ml 1X kloroplasti kohta. Isolatsioonipuhver. Vahetult enne kasutamist lisage 1 µL DTT-d 1 ml kloroplasti isolatsioonipuhvri kohta. Märgistage see puhver kui "Täielik puhver ".

Mis on kloroplasti isolatsioonipuhvris?

DNA isoleerimispuhver koosnes 100 mM NaCl-st, 100 mM Tris-HCl-st (pH 8,0), 50 mM EDTA-st ja 1 mM DTT-st. kloroplasti pellet koos 8 ml DNA isoleerimispuhvriga, 1,5 ml 20% SDS-i, 20 µl 2-merkaptoetanooli ja 30 µl proteinaas K-ga (10 mg/ml) tsentrifuugitorusse temperatuuril 55 °C 4 tundi.

Milline on kloroplasti eraldamise protokollis spinatilehtede homogeniseerimiseks kasutatava puhvri pH?

Spinat sisaldab häid kloroplaste ja need isoleerivad kergesti. Peate panema lehed külma segistisse, milles on 0,1 M fosfaatpuhvrit, pH 7,5 ja 0,5 M sahharoosi, et vältida nende purunemist.