Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) test on meetod, mida kasutatakse valgu-valgu interaktsiooni otseseks visualiseerimiseks in vivo kasutades elusrakkude kujutist või fikseeritud rakke. … BiFC-d kirjeldasid esmakordselt Hu jt.
Kuidas bimolekulaarne fluorestsentsi komplementatsioon toimib?
BiFC tööpõhimõte põhineb fluorestseeruva kompleksi väljatöötamisel, mis tuleneb fluorestseeruva valgu kahe segmendi ühendamisest, kui need on valgu-valgu interaktsiooni tõttu fragmentides vahetus läheduses, st., BiFC-s on fluorofoor jagatud amino- ja karboksüülterminaalseteks otsteks.
Mis on BiFC test?
bimolekulaarse fluorestsentsi komplementatsiooni (BiFC) test võimaldab elusrakkudes valkude interaktsioonide lihtsat ja otsest visualiseerimist (45). BiFC lähenemisviis põhineb fluorestseeruva kompleksi moodustumisel, kui kaks valku, mis on liidetud fluorestseeruva valgu mittefluorestseeruvate fragmentidega, interakteeruvad üksteisega (joonis
Miks tehakse BiFC testi?
BiFC idee on ekspresseerida pooled GFP-st, mis on liidetud teie huvipakkuvate valkudega Kui POI-d interakteeruvad, võite mõlemad pooled kokku viia, et saada funktsionaalne GFP. Nii et kui rakus on ekspresseeritud pool GFP-st, ei ole ma üllatunud, et GFP antikeha suudab selle tuvastada.
Kas BiFC on pöörduv?
BiFC komplekside pöördumatus on hästi dokumenteeritud (10) ja näib, et enamik, kui mitte kõik, fluorestsentsvalgul põhinevad BiFC süsteemid on pöördumatud (8, 33, 43, 48–51).
