Agaroosgeelelektroforeesi kasutatakse tavaliselt DNA fragmentide eraldamiseks pärast restriktsiooni endonukleaasi lõhustamist või PCR amplifikatsiooni. Fragmendid tuvastatakse, värvides geeli interkalatsioonivärvi etiidiumbromiidiga, millele järgneb visualiseerimine/fotograafia ultraviolettvalguses.
Kuidas kasutada agaroosgeeli elektroforeesis?
1. Geeli valmistamine
- Kaaluge sobiv mass agaroosi Erlenmeyeri kolbi. Agaroosgeelid valmistatakse massi/mahuprotsendilise lahuse abil. …
- Lisage agaroosi sisaldavasse kolbi jooksupuhver. Keerake segamiseks. …
- Sulata agaroosi/puhvri segu. …
- Lisage etiidiumbromiidi (EtBr) kontsentratsioonini 0,5 μg/ml.
Kuidas te geelelektroforeesi kasutate?
Põhipunktid:
- Geelelektroforees on tehnika, mida kasutatakse DNA fragmentide eraldamiseks nende suuruse järgi.
- DNA proovid laaditakse geeli ühes otsas olevatesse süvenditesse (süvenditesse) ja nende tõmbamiseks läbi geeli rakendatakse elektrivoolu.
- DNA fragmendid on negatiivselt laetud, seega liiguvad nad positiivse elektroodi poole.
Mis on geelelektroforeesi põhifunktsioon?
Geelelektroforees on laborimeetod , mida kasutatakse DNA, RNA või valkude segude eraldamiseks molekuli suuruse järgi.
Milleks kasutatakse elektroforeesi?
Elektroforees on laboritehnika, mida kasutatakse DNA, RNA või valgu molekulide eraldamiseks nende suuruse ja elektrilaengu alusel. Elektrivoolu kasutatakse eraldatavate molekulide liigutamiseks läbi geeli.
