Antikehade mittespetsiifilise seondumise ja sellest tulenev alt taustasignaali vähendamiseks on soovitatav kasutada enne antikehadega inkubeerimist blokeerivat lahust Kõige tõhusam blokeerimislahendus olgu see, mis sisaldab sama liigi seerumit, milles tekkis sekundaarne antikeha.
Kuidas vältida taustaplekke?
Koelõikude paksuse vähendamine võib aidata vähendada tausta määrdumist. Proovige puhtama IHC saamiseks lõigata õhemaid lõike. Samuti on oluline hoolitseda selle eest, et sektsioonid ei kuivaks, kuna kuivatamine võib põhjustada tugevat mittespetsiifilist määrdumist.
Kuidas optimeerite immunofluorestsentsi?
Immunofluorestsentsmikroskoopia: 10 tehnilist nõuannet edu saavutamiseks
- Rakkude fikseerimine ja läbilaskvus. …
- Antikehade spetsiifilisus. …
- Sobiva antikeha lahjenduse kasutamine. …
- Puhvrite ja blokeerimisvahendite optimeerimine. …
- Sobiva rakutiheduse kasutamine. …
- Mitmekordne värvimine. …
- Sekundaarsed antikehad. …
- Tausta vähendamine.
Mis põhjustab tausta määrdumist?
Taustavärvimine võib olla põhjustatud antikehade ebasobivast sidumisest või vigadest koeslaidi valmistamisel.
Kas sekundaarsed antikehad vähendavad taustsignaale?
F(ab)-spetsiifilised sekundaarsed antikehad võivad aidata vähendada taustsignaali, kõrvaldadessekundaarse antikeha poolt kudedes leiduvate IgG valkude mittespetsiifilise seondumise.
