RIPA puhvrit saab külmutada ja sulatada 2-3 korda ilma oma tugevust kaotamata, kui seda kasutamise ajal (20-30 min) jääl hoitakse. Hoidke puhvrit külmutatult temperatuuril -80 °C.
Kui kaua saan RIPA puhvrit säilitada?
1. Kui puhvrit kasutatakse pidev alt, on soovitatav hoida 10x puhvrit temperatuuril 4 °C 1-2 nädalat. Pikemat aega tuleks puhvrit hoida temperatuuril -20°C. Paljude väikeste katsete läbiviimiseks on soovitatav jaotada 10x puhvri alikvootideks.
Kas RIPA puhvrit saab salvestada aadressil?
Ettevalmistatud RIPA puhver tuleks jagada alikvootidega ja säilitada temperatuuril −20°C. Enne kohest kasutamist lisage sulatatud alikvoodile proteaasi ja/või fosfataasi inhibiitoreid. Ühest milliliitrist puhvrist piisab ligikaudu 5 miljoni raku lüüsimiseks. …
Kuidas te RIPA lüsaate säilitate?
Kasutage valmistatud lüsaate nii kiiresti kui võimalik ja säilitage võimalikult lühikest aega. Hoidke lüsaate - 80 ℃ nii kaua kui võimalik. Lüsaatide puhul, mida tuleb pikka aega säilitada, viige värskelt valmistatud katseklaasid saadaolevasse -80 ℃ sügavkülma, et vältida lagunemist.
Kuidas RIPA puhvrit üles sulatate?
Pärast lõpliku pesulahuse eemaldamist rakkudest lisage rakusademele sobiv kogus RIPA puhvrit (1 ml 0,5–5 × 107 raku kohta) ja segage või loksutage korraks rakkude täielikuks resuspendeerimiseks. Inkubeerige jääl või külmkapis (2–8 °C) viis minutit.